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關于酶標儀
發布日期:2022/9/7 17:55:13

酶標儀(Microplate Reader)是對酶聯檢測(EIA)實驗結果進行讀取和分析的專業儀器。酶聯反應是通過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應結果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。

酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。

光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號。電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,最后由顯示器和打印機顯示結果。

微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡單。

微孔板是一種經事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。其常見規格有40孔板,55孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規格的孔板,對其可進行一孔一孔的檢測或一排一排的檢測。

酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源燈發出的光經聚光鏡,光柵后到達反射鏡,經反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經濾光片送到光電管。

酶標儀有單通道和多通道兩種類型,單通道又分為自動型和手動型兩種。其中,自動型的儀器設有X和Y兩個方向的驅動機構,在機械裝置的驅動下,微孔板上的小孔一個個依次進入光束下面測試。手動型靠手移動微孔板來進行測量。

在單通道酶標儀的基礎上,又發展了多通道、全自動型酶標儀。多通道酶標儀一般都是自動型的,它設有多個光束和多個光電檢測器。如8通道的儀器,設有8條光束(或8個光源)、8個檢測器和8個放大器。在機械驅動裝置的作用下,樣品被8個一排、8個一排檢測。多通道酶標儀的檢測速度快,但其結構比較復雜,價格也較貴,多用于大中型醫院。

酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯檢測試劑盒的應用,使得酶標儀在繁殖保健領域中應用越來越廣泛,同時促進了繁殖健康技術水平提高。目前在國內血站臨床試驗室中酶標儀成為ELISA測定的重要工具。在農業中利用酶標儀研究酚氧化酶,為開發以該酶為靶標的新型害蟲控制劑提供理論依據。伏馬菌素是最近發現的一族主要由幾種真菌產生的結構相關的毒素代謝產物,該毒素已被世界衛生組織列為近年來首先進行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標儀對微孔板進行光學測量,可以檢測伏馬菌素的含量,在食品安全方面有著重要的應用。生長曲線一般指菌落總數CFU/mI。或者菌落總數的對數log CFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規律。目前通過分光光度計測定菌懸液時存在即時性差、操作繁瑣、易污染等缺點,由于酶標儀是一種快速、準確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節約時間。

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