1、全自動生化分析儀有那些模塊組成 ?
光學系統:老式的ACA系統采用鹵鎢燈、透鏡、濾色片、光電池組件。
新式ACA系統光學部分有很大的改進,ACA的分光系統因其光位置不同有前分光和后分光之分,先進的光學組件在光源與比色杯之間使用了一組透鏡,將原始光源燈投射出的光通過比色杯將光束變成光速(這與傳統的契型光束不同),這樣,即使比色杯再小,點光束也能通過。與傳統方法相比,能節約試劑消耗40-60%。
點光束通過比色杯后,在經這一組還原透鏡(廣差糾正系統),將點光束還原成原始光束,在經光柵分成固定的若干種波長(約10種以上波長)。
采用光/數碼信號直接轉換技術即將光路中的光信號直接變成數碼信號。將電磁波對信號的干擾及信號傳遞過程中的衰減完全消除。
同時,在信號傳輸過程中采用光導纖維,使信號達到無衰減,測試精度提高近100倍。光路系統的封閉組合,又使得光路無需任何保養,且分光準確、壽命長。
恒溫系統:由于生物化學反應時溫度對反應結果影響很大,故恒溫系統的靈敏度、準確度直接影響測量結果。
早期的生化儀器采用空氣浴的方法,后來發展到集干式空氣浴與水浴優點于一身的恒溫液循環間接加溫干式浴。
其原理是在比色杯周圍設計一恒溫槽,在槽內加入一種無味、無污染、不蒸發、不變質的穩定恒溫液,恒溫液的容量大,熱穩定性好、均勻。在比色杯不直接接觸恒溫液,克服了水浴式恒溫易受污染和空氣浴不均勻、不穩定的特點。
樣品反應攪拌技術和探針技術:傳統的反應攪拌技術采用磁珠式和渦旋攪拌式兩種。
現在流行的攪拌技術是模仿手工清洗過程的多組攪拌棒組成的攪拌單元,當第一組攪拌棒在攪拌樣品/試劑或混合溶液時,第二組攪拌棒同時進行高速高效的清洗,第三組攪拌棒也同時進行溫水清洗和風干過程。
在單個攪拌棒的設計上,采用新型螺旋型高速旋轉攪拌,旋轉方向與螺旋方向相反,從而增加了攪拌的力度,被攪拌液不起泡,減少微泡對光的散射。
試劑及樣品探針依照早期電容式傳感的原理,但略加改進,增加了血凝塊和蛋白質凝塊的報警,依照報警級別的重測結果,減少吸樣誤差,提高測試結果的可靠性。
大型生化儀器每小時檢測數多在1000個以上,因此自動重測相當重要,測試結果的主觀評價和手工重測已不能滿足臨床的需要。
其他方面:試劑、樣品的條形碼識別和計算機登錄,早期生化儀器由于缺乏條碼識別功能,出現錯誤機會較多。近幾年無論進口、國產生化儀器均采用條碼檢測,這項技術在生化儀器上的使用給高速ACA的研制提供了技術支持,也使得儀器相當支持。軟件的開發簡單易行,因此,條碼檢測是儀器智能化的基礎。開放式試劑,作為醫院選擇機型的一項重要因素,儀器是否支持開放式試劑非常重要。試劑開放后,醫院、科研單位可自主選擇試劑供應商,在衡量價格、低度器結果的可靠性、試劑有效期等方面有了較大的自由度。離子選擇電極分析附件(ISE)、人體血清和尿液電解質指標相當重要,ACA系統附帶ISE后,醫院可節省費用。
2、全自動生化分析儀原理有那些?
全自動生化分析儀就是將原始手工操作過程中的取樣、混勻、溫浴(37℃)檢測、結果計算、判斷、顯示和打印結果及清洗等步驟全部或者部分自動運行。
如今,生化檢驗基本上都實現了自動化分析,還有專為大型或超大型臨床實驗室和商業實驗室設計的全自動生化分析系統,可根據實驗室的檢測量任意配置。
無論是當今運行速度最快(9800Test/h)的模塊式全自生化分析儀,還是原始手工操作用于比色的光電比色計,其原理都是運用了光譜技術中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。
雙波長檢測原理的作用:
1. 消除噪音干擾。
2. 減少雜散光影響。
3. 減少樣品本身光吸收的干擾:當樣品中存在非化學反應的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時,會產生非特異性的光吸收,雙波長方式可以部分消除這類光吸收干擾。
3、其他方面問題。
為什么干擾物主波長和次波長越臨近越好?
雙波長設置的情況是,干擾物的光一般會出現光散射和非特異性光吸收,就需要設置主波長和副波長,主波長就是待測物質特征吸收峰處。副波長設置的原則是干擾物在主波長的吸收與副波長吸光率越接近越好,如己糖激酶法測血糖,340nm作為主波長,380nm為副波長,血清蛋白在340nm和380nm處具有幾乎同等的吸收峰,因此能消除血紅蛋白的干擾。所以干擾物主波長和次波長越臨近越好。
測定要求
1. 樣品:血清、尿液、腦脊液等。
2. 試劑:單試劑、雙試劑
3. 雙波長:由主波長和副波長構成的兩個波長。可以消除在檢測過程中的干擾。
4. 校準品(標準):比對未知樣品的濃度
5. 質控品:用于生化儀在日常工作中對儀器、試劑等方面狀態的監控。
方法
1. 終點法(endessay)完全被轉化成產物,不再進行反應達到終點,取反應終點的吸光度來計算被測物質的濃度。生化檢驗中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點法來進行檢測。
1)一點終點法:取反應達終點時的一個點的吸光度來計算結果。
2)二點終點法:取反應尚未開始時讀取一個點的吸光度,待反應達終點時再取第二點的吸光度。用第二點吸光度減去第一點吸光度的差值來計算結果。主要用于扣除試劑和樣品空白。保證結果的準確性。一般雙試劑用。
2. 固定時間法(兩點法):是取尚在反應中的兩點間的差值來計算結果。此兩點既不是反應起始點也不是終點。主要用于檢測一些非特異性的項目,如肌酐。
3. 連續監測法(動力學法、速率法):是在測定酶的活性或酶代謝產物時,連續取反應曲線中呈線性變化吸光度值(△;A/min)來計算結果。因在反應線性時間內各點間的吸光度差值為零故又稱謂零級反應。
試劑問題
混成單一:比如酶法肌酐試劑,第一步R1中的酶要消除樣品中內源性肌酸的干擾,如果混成單一試劑,則會使檢測結果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成單一試劑,因為它們都要分別清除HDL和LDL以外的脂蛋白,從而達到檢測的目的,如果混成單一試劑,則會使測定的HDL和LDL不準確。
另外,有的試劑混成單一試劑后,穩定性和抗干擾能力也會明顯下降。
解決辦法:
①在儀器通道或試劑位允許的情況下盡量使用雙試劑;
②如一定要使用單一試劑,最好選擇試劑廠家針對部份項目專門生產好的單一試劑。
開瓶:隨著全自動生化分析儀的普及,“開瓶穩定性”也隨之受到了大家的重視,但是就目前有的試劑方法學來講,還達不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內放很長時間不需要定標,比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑,開瓶后試劑會吸收空氣中的二氧化碳,使試劑本身的PH值下降。
如果長時間開瓶不定標或校準,會使檢測結果發生偏離,在國外有的項目有明文規定,必須72小時之內定標,比如BUN。
但是在國內的某些實驗室為了方便,很長時間都不作校準,導致測定結果的不準確。解決辦法:了解試劑的特性,及時對部份項目進行校準,對于每天標本量不多的醫院,可按1~2天的用量取用試劑放入儀器。
相混:將不同批號的試劑混合在一起使用的現象在檢驗中經常發生,當然這一方面是為了節省成本,另一方面為了方便。
但是不管是什么品牌、什么試劑,由于不同批號的試劑生產時間不同,試劑中工具酶的活性會有差異,會發生水解的底物濃度隨時間長短也會不同。因此混在一起使用而又不定標,可能會導致檢測結果的不準確。還有如果有的試劑開瓶時間太長,空氣中的灰塵或細菌會進入瓶中,由于有的試劑含有大量的蛋白質和鹽,是細菌生長的最好條件,雖然有的試劑添加了防腐劑,但防腐劑的防腐也是有一定限度的,而且絕大多數廠家的試劑中是沒有加防霉劑的。
解決辦法:
① 不同批號試劑建議不要混用,如果混用最好重新定標;
②試劑瓶在儀器內使用時間不要過長,及時更換;
③一般每個試劑瓶內由于試劑針不能吸完,或多或少都會留有幾毫升的試劑,如果是同一批號可以將未開瓶的同一批號試劑往里倒。但如果不是同一批號的試劑時倒人后最好定標,最好的做法是將每個批號的剩余試劑留起來待一定數量后混在一起,然后重新定標后檢測。
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